রেড ব্লাড সেল লাইসিস বাফার

রেড ব্লাড সেল লাইসিস বাফার (ACK লাইসিস বাফার) হল একটি ক্লাসিক লাইসিস সলিউশন যা নিউক্লিয়েটেড কোষের ক্ষতি না করে লাল রক্ত ​​কণিকা অপসারণের জন্য ডিজাইন করা হয়েছে। এরিথ্রোসাইট লাইসেট টিস্যু কোষগুলিকে লাইসেস করে যেগুলিতে এরিথ্রোসাইট থাকে না এবং প্রাথমিক সংস্কৃতি, কোষের ফিউশন, প্রবাহ সাইটোমেট্রিক বিশ্লেষণ, নিউক্লিক অ্যাসিড এবং প্রোটিন পৃথকীকরণ এবং নিষ্কাশনের জন্য আরও ব্যবহার করা যেতে পারে। মূল নীতি হল কোষের ঝিল্লি ফুলে যাওয়ার জন্য অন্তঃকোষীয় অসমোলারিটির পার্থক্য ব্যবহার করে এরিথ্রোসাইটগুলিকে লাইজ করা। প্রধান উপাদানগুলির মধ্যে রয়েছে অ্যামোনিয়াম ক্লোরাইড, পটাসিয়াম বাইকার্বনেট এবং EDTA-Na2। অ্যামোনিয়াম আয়নগুলি কোষের ঝিল্লির মধ্য দিয়ে যেতে পারে না, যখন অন্যান্য আয়নগুলি কোষের ভিতরে এবং বাইরের মধ্যে আয়নের ঘনত্বের পার্থক্য এবং কোষে বাহ্যিক জলের প্রসারণ ঘটায়, যার ফলে লোহিত রক্তকণিকাগুলি ফুলে যায় এবং অর্জন করতে পারে। lysis প্রভাব। পণ্যটি 0.2 μm ফিল্টার মেমব্রেন দ্বারা ফিল্টার এবং জীবাণুমুক্ত করা হয়।

ভেজা বরফ দিয়ে জাহাজ; 2-8 ডিগ্রিতে স্টোর করুন, 12 মাসের জন্য বৈধ।

টিস্যু/কোষের নমুনা:

1. তাজা টিস্যু ট্রিপসিন বা কোলাজেনেস দ্বারা পরিপাক হয় এবং পৃথক কোষ সাসপেনশনে ছড়িয়ে পড়ে। 4 ডিগ্রীতে 5 মিনিটের জন্য 300-400 গ্রাম সেন্ট্রিফিউজ করুন এবং সুপারনাট্যান্ট বাদ দিন।

2. 1:3-5 অনুপাতে কোষের বর্ষণে লোহিত রক্তকণিকা লাইসিস বাফার যোগ করুন, আলতো করে ফুঁ দিয়ে মিশ্রিত করুন এবং 1-2 মিনিটের জন্য লাইস করুন।

3. 4 ডিগ্রীতে 5-8 মিনিটের জন্য 800-1000 rpm-এ সেন্ট্রিফিউজ করুন, তারপর লাল সুপারনাট্যান্ট বাদ দিন। লিসিস অসম্পূর্ণ হলে পদক্ষেপ 2 এবং 3 পুনরাবৃত্তি করুন।

4. প্রিপিপিটেটেড ভগ্নাংশে হ্যাঙ্কের দ্রবণ বা সিরাম-মুক্ত কালচার মিডিয়ামের 3-5 mL যোগ করে কোষগুলিকে পুনরায় চালু করা হয়েছিল, এবং তারপর 4 ডিগ্রিতে 300-400 g এ 3-5 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। কোষ ধোয়ার জন্য এই ধাপটি 2-3 বার পুনরাবৃত্তি করা হয়েছে।

5. পরবর্তী পরীক্ষা-নিরীক্ষার জন্য প্রয়োজন অনুসারে উপযুক্ত সমাধান সহ পুনরায় সাসপেন্ড করা কোষ; RNA নিষ্কাশনের জন্য, ধাপ 4-এর শুরুতে DEPC জল দিয়ে প্রস্তুত করা দ্রবণ ব্যবহার করা বাঞ্ছনীয়।

1. তাজা অ্যান্টিকোয়াগুল্যান্ট রক্ত, সেন্ট্রিফিউগেশনের পরে সুপারনাট্যান্ট বাদ দিন।

2. কোষের বৃষ্টিপাতের পরিমাণ প্রাক-অনুমান করুন এবং 1:6-10 অনুপাতে কোষের বৃষ্টিপাতের মধ্যে 2-8 ডিগ্রি প্রি-কুলড রেড ব্লাড সেল লাইসিস বাফার যোগ করুন। উদাহরণস্বরূপ, 0.2 মিলি কোষের বৃষ্টিপাতের জন্য, 1 যোগ করুন৷{9}}৷{10}} লোহিত রক্তকণিকা লাইসিস বাফারের মিলি, মিশ্রিত করার জন্য আলতোভাবে ঘা, এবং {{11} এর জন্য লাইজড করুন৷ 4 ডিগ্রী বা ঘরের তাপমাত্রায় মিনিট।

3. 4 ডিগ্রীতে 5-8 মিনিটের জন্য 800-1000 rpm-এ সেন্ট্রিফিউজ করুন, তারপর লাল সুপারনাট্যান্ট বাদ দিন। যদি এরিথ্রোসাইট লাইসিস অসম্পূর্ণ হয়, তাহলে ধাপ 2 এবং 3 একবার পুনরাবৃত্তি করুন;

4. প্রিপিপিটেটেড ভগ্নাংশে হ্যাঙ্কের দ্রবণ বা সিরাম-মুক্ত সংস্কৃতির মাধ্যম যোগ করে কোষগুলিকে পুনরায় চালু করা হয়েছিল, এবং তারপর 4 ডিগ্রিতে 3-5 মিনিটের জন্য 300-400 গ্রাম সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। কোষ ধোয়ার জন্য এই ধাপটি 2-3 বার পুনরাবৃত্তি হয়েছিল;

5. পরবর্তী পরীক্ষা-নিরীক্ষার জন্য প্রয়োজন অনুসারে উপযুক্ত সমাধান সহ পুনরায় সাসপেন্ড করা কোষ; RNA নিষ্কাশনের জন্য, ধাপ 4-এর শুরুতে DEPC জল দিয়ে প্রস্তুত করা দ্রবণ ব্যবহার করা বাঞ্ছনীয়।

1. এই পণ্য ফিল্টার এবং নির্বীজিত করা হয়েছে. দূষণ এড়াতে অ্যাসেপটিক অপারেশনে মনোযোগ দেওয়া উচিত।

2. যদি ফলো-আপ পরীক্ষাটি কোষের সংস্কৃতির জন্য ব্যবহার করা হয়, তবে কোষের দূষণ এবং কোষের সংস্কৃতিকে প্রভাবিত না করার জন্য অ্যাসেপটিক অপারেশনের দিকে মনোযোগ দিয়ে অপারেশনটি অতি-পরিচ্ছন্ন বেঞ্চে সম্পন্ন করা উচিত।

3. কেন্দ্রাতিগ ধোয়ার পরে, যদি খুব অল্প পরিমাণে এরিথ্রোসাইট পাওয়া যায়, তাহলে পরবর্তী সনাক্তকরণকে প্রভাবিত না করে পরীক্ষা চালিয়ে যাওয়া যেতে পারে।

4. আপনার নিরাপত্তা এবং স্বাস্থ্যের জন্য, অনুগ্রহ করে নিরাপত্তা চশমা, গ্লাভস বা প্রতিরক্ষামূলক পোশাক পরুন।

শুধুমাত্র গবেষণা ব্যবহারের জন্য!

গরম ট্যাগ: লাল রক্ত ​​​​কোষ lysis বাফার, চীন লাল রক্ত ​​​​কোষ lysis বাফার নির্মাতারা, সরবরাহকারী, কারখানা