ক্যালসিন-এএম/পিআই লিভিং / ডেড সেল ডাবল স্টেনিং কিট

 

পণ্যের নাম	বিড়াল না.	স্পেক
ক্যালসিন-এএম/পিআই লিভিং / ডেড সেল ডাবল স্টেনিং কিট	G 1707-100T	100T

 

 

ক্যালসিন এএম ক্যালসিন (ক্যালসিন এসিটক্সিমিথাইল এস্টার) এর উপর ভিত্তি করে এবং একটি এসিটাইলমেথক্সিমিথাইল এস্টার (এএম) গ্রুপ প্রবর্তন করে, যা ক্যালসিয়াম চেলেট করে ক্যালসিনের আণবিক অংশকে শুধু মুখোশই রাখে না, বরং এর হাইড্রোফোবিসিটিও বাড়ায়, এইভাবে ক্যালসিন এএম-এর পেমব্রেনেট পেইন্টারকে সহজ করে দেয়। জীবন্ত কোষ। যখন ক্যালসিন এএম কোষে প্রবেশ করে, তখন এটি অন্তঃসত্ত্বা সেলুলার এস্টেরেস দ্বারা ক্যালসেইনের সাথে শিয়ার করা যায়। এএম গ্রুপের ক্ষতির সাথে, ক্যালসিন সহজে কোষের ঝিল্লির মধ্য দিয়ে যেতে পারে না এবং এইভাবে কোষের ভিতরে ধরে রাখা হয়; এছাড়াও চিলেটেড ক্যালসিয়ামের আণবিক অংশটি আংশিকভাবে উন্মুক্ত হয় এবং ক্যালসিন প্রোব অন্তঃকোষীয় ক্যালসিয়াম আয়নের সাথে আবদ্ধ হলে একটি শক্তিশালী সবুজ প্রতিপ্রভ নির্গত করতে সক্ষম হয়। মৃত কোষে এস্টেরেজের অভাব রয়েছে, যা ক্যালসিন এএম কে ক্যালসিনে হাইড্রোলাইজ করতে পারে না এবং তাই লেবেল করা যায় না। পিআই (প্রপিডিয়াম আয়োডাইড) লাল প্রতিপ্রভ তৈরি করতে সেলুলার ডিএনএ ডাবল হেলিক্সে নিজেকে এম্বেড করতে সক্ষম, কিন্তু এটি জীবন্ত কোষের ঝিল্লিকে সরাসরি দাগ দিতে পারে না। কোষ, এবং শুধুমাত্র মৃত কোষগুলিকে দাগ দিতে পারে যেখানে কোষের ঝিল্লি ব্যাহত হয়েছে। এইভাবে PI-এর সাথে Calcein-AM-এর সংমিশ্রণ জীবিত এবং মৃত কোষ উভয়েরই স্টেনিং লেবেলিংয়ের অনুমতি দেয়।

এই কিটটি উপরোক্ত নীতিগুলির উপর ভিত্তি করে তৈরি করা হয়েছে এবং জীবিত কোষগুলির ক্যালসিন-এএম লেবেলিং এবং মৃত কোষগুলির PI লেবেলিং দ্বারা ডাবল স্টেনিং লেবেলিং সঞ্চালনের জন্য আমাদের কোম্পানি দ্বারা অপ্টিমাইজ এবং ডিবাগ করা হয়েছে, এইভাবে জীবিত এবং মৃত কোষ উভয় স্তরের বিশ্লেষণের অনুমতি দেয়৷

 

 

ভেজা বরফ দিয়ে জাহাজ; আলো থেকে -20 ডিগ্রি দূরে স্টোর করুন, বৈধ 12 মাস।

 

 

কম্পোনেন্ট নম্বর	কম্পোনেন্ট	G 1707-100T
G1707-1	ক্যালসিন-এএম সমাধান	20 μL
G1707-2	পিআই সমাধান	20 μL
G1707-3	সনাক্তকরণ বাফার	10 মিলি
ম্যানুয়াল		এক কপি

দ্রষ্টব্য: উপরের প্রতিক্রিয়া সময়গুলি একটি একক 100 μL সিস্টেম সনাক্তকরণ।

 

 

1. ক্যালসিন এএম/পিআই কার্যকরী সমাধান প্রস্তুত করা

ক) ফ্রিজার থেকে ক্যালসিন-এএম সলিউশন, পিআই দ্রবণ এবং সনাক্তকরণ বাফার সরান, তারপর তাদের ঘরের তাপমাত্রায় উষ্ণ হতে দিন।

খ) প্রয়োজন অনুযায়ী কার্যকরী সমাধান কনফিগার করুন, কনফিগারেশন সিস্টেম নিম্নলিখিত সারণীটি উল্লেখ করতে পারে, মনে রাখবেন যে বিভিন্ন কোষের বিভিন্ন বৈশিষ্ট্য রয়েছে, পরীক্ষাটি ব্যবহৃত প্রোবের ঘনত্বের প্রকৃত পরিস্থিতি অনুসারে যোগ বা হ্রাস করা যেতে পারে, বেশিরভাগ কোষের তরল অনুপাত 1:500-2000 এর মধ্যে;

 

	10টি নমুনা	50টি নমুনা	100টি নমুনা
ক্যালসিন-এএম সমাধান	2 μL	10 μL	20 μL
পিআই সমাধান	2 μL	10 μL	20 μL
সনাক্তকরণ বাফার	1 মি.লি	5 মি.লি	10 মিলি

 

2. সেল স্টেনিং মার্কার:

ক) পরীক্ষামূলক প্রয়োজন অনুসারে, ওষুধ বা অন্যান্য উদ্দীপনা দিয়ে কোষের চিকিত্সা করুন;

খ) অনুগত কোষগুলির জন্য, প্রথমে সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহ করুন, ট্রিপসিন দ্বারা অবশিষ্ট অনুগত কোষগুলিকে হজম করুন এবং সমস্ত কোষকে ভালভাবে মিশ্রিত করুন। স্থগিত কক্ষের জন্য, সরাসরি সমস্ত কক্ষ সংগ্রহ করুন।

গ) সংগৃহীত কোষগুলিকে 800-1,000 rpm-এ 3-5 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন, সুপারনাট্যান্ট অপসারণ করুন এবং পিবিএস বা অন্যান্য বাফার দিয়ে কোষগুলিকে 2-3 বার পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে ধুয়ে ফেলুন। অবশিষ্ট esterase কার্যকলাপ;

d) উপরে প্রাপ্ত সেল পেলেটে ক্যালসিন এএম/পিআই সনাক্তকরণ কার্যকরী সমাধান যুক্ত করুন এবং কোষগুলিকে আলতোভাবে এবং পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে পুনরুদ্ধার করুন। আমরা 1×105~1×106/mL এ কোষের ঘনত্ব নিয়ন্ত্রণ করতে কোষগুলিকে পুনরায় সাসপেন্ড করার জন্য Calcein AM/PI সনাক্তকরণ কার্যকরী সমাধানের সুপারিশ করি৷

e) অন্ধকারে 15-30 মিনিটের জন্য 37ºC তাপমাত্রায় সেঁকুন।

3. সেল স্টেনিং পর্যবেক্ষণ:

ক) পরীক্ষামূলক প্রয়োজনীয়তা অনুসারে, ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ, ফ্লো সাইটোমেট্রি, মাইক্রোপ্লেট রিডার এবং অন্যান্য যন্ত্র জীবিত কোষ এবং মৃত কোষের স্তর পর্যবেক্ষণ ও বিশ্লেষণ করতে ব্যবহার করা যেতে পারে;

খ) ক্যালসিন-এএম দ্বারা লেবেল করা জীবন্ত কোষগুলি সবুজ প্রতিপ্রভ, EX/EM=494/517 nm সহ; PI-এর লেবেলযুক্ত মৃত কোষগুলি হল লাল প্রতিপ্রভ, EX/EM=535/617 nm৷

 

 

1. বিভিন্ন কোষ থেকে কোষের বৈশিষ্ট্য এবং বিভিন্ন সনাক্তকরণ পদ্ধতির কারণে, ধাপে বর্ণিত প্রোবের ঘনত্ব এবং ইনকিউবেশন সময়সীমা শুধুমাত্র রেফারেন্সের জন্য এবং এটি নির্দিষ্ট পরিস্থিতি অনুযায়ী সামঞ্জস্য করা যেতে পারে।

2. সমস্ত রঞ্জকগুলিরই নিভানোর সমস্যা রয়েছে, অনুগ্রহ করে ফ্লুরোসেন্ট রঞ্জক বা দাগযুক্ত নমুনাগুলি পরিচালনা করার সময় আলো থেকে দূরে থাকুন যাতে ফ্লুরোসেন্সের নির্গমনকে ধীর করা যায়৷

3. ক্যালসিন-এএম আর্দ্রতার প্রতি খুবই সংবেদনশীল, অনুগ্রহ করে প্রথমবার ব্যবহার করার সময় পরীক্ষামূলক ব্যবস্থা অনুযায়ী যথাযথভাবে বিতরণ করুন। ক্যালসিন এএম/পিআই অ্যাস ওয়ার্কিং সলিউশন এখনই বিতরণ করা উচিত এবং ব্যবহার করা উচিত।

4. আপনার স্বাস্থ্য এবং নিরাপত্তার জন্য, অনুগ্রহ করে নিরাপত্তা চশমা, গ্লাভস বা প্রতিরক্ষামূলক পোশাক পরুন।

 

শুধুমাত্র গবেষণা ব্যবহারের জন্য!

 

 

গরম ট্যাগ: ক্যালসিন-এএম/পি লিভিং / ডেড সেল ডাবল স্টেনিং কিট, চায়না ক্যালসিন-এএম/পি লিভিং / ডেড সেল ডাবল স্টেনিং কিট প্রস্তুতকারক, সরবরাহকারী, কারখানা