PEI 40K ট্রান্সফেকশন রিএজেন্ট

PEI 40K ট্রান্সফেকশন রিএজেন্ট (লিনিয়ারাইজড পলিইথিলিনাইমাইন ট্রান্সফেকশন রিএজেন্ট) হল একটি উচ্চ চার্জযুক্ত ক্যাটানিক পলিমার যার আণবিক ওজন 40,000 রৈখিক পলিথিনইমিনের উপর ভিত্তি করে, যা ইতিবাচকভাবে চার্জ করা হয় এবং কার্যকরভাবে নেতিবাচকভাবে চার্জযুক্ত নিউক্লিক অ্যাসিডকে একটি কমপ্লেক্স গঠন করতে পারে। তাদের এবং কোষে তাদের পরিচয় করিয়ে দেয়, এবং এটি প্লাজমিডের স্থানান্তরের জন্য উপযুক্ত কোষে ডিএনএ। PEI 40K (লিনিয়ারাইজড পলিইথিলিনাইমাইন) ট্রান্সফেকশন রিএজেন্টের কম সাইটোটক্সিসিটি, উচ্চ ট্রান্সফেকশন দক্ষতা এবং কম খরচ রয়েছে, যা লাইপোসোম-ভিত্তিক ট্রান্সফেকশন রিএজেন্টের তুলনায় এটিকে খুব সাশ্রয়ী করে তোলে। এটি যাচাই করা হয়েছে যে লিনিয়ার PEI 40K ট্রান্সফেকশন রিএজেন্ট HEK-293, HEK293T, CHO-K1, COS-1, COS-7, NIH/ সহ বিভিন্ন সেল লাইনে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয় 3T3, Sf9, HepG2, এবং হেলা কোষ, ইত্যাদির স্থানান্তর দক্ষতা যত বেশি 80%~90%। এই পণ্যের প্রধান উপাদান PEI 40K এর ঘনত্ব হল 1 mg/mL।

ভেজা বরফ দিয়ে জাহাজ; -20 ডিগ্রিতে স্টোর করুন, 6 মাসের জন্য বৈধ। অথবা 4 ডিগ্রিতে স্টোর করুন, 3 মাসের জন্য বৈধ।

1. অনুগত কোষের স্থানান্তরের আগে প্রস্তুতি (6-ওয়েল প্লেট, অন্যান্য স্পেসিফিকেশনের জন্য রেফারেন্স টেবিল):

ক) স্থানান্তরের আগের দিন, কোষগুলি ছিদ্র প্লেটে সমানভাবে রোপণ করার জন্য উপযুক্ত ছিল

আনুষ্ঠানিক ট্রান্সফেকশনের সময় 70-85% এ একত্রিত হওয়ার জন্য উপযুক্ত ঘনত্ব;

খ) ট্রান্সফেকশনের আগে, সিরাম বা কম সিরাম (5% এর নিচে), বা অপটি-এমইএম ছাড়া 1.8 মিলি বেস মিডিয়াম প্রতিস্থাপন করার আগে প্রাথমিক কোষ মিডিয়া অপসারণ এবং পিবিএস দিয়ে 1-2 বার ধুয়ে ফেলা হয়েছিল; নির্দিষ্ট কোষের ধরণের উপর নির্ভর করে বিভিন্ন কোষের বিভিন্ন সিরাম নির্ভরতা ছিল;

গ) অ্যাপেড কোষগুলি ইনকিউবেটরে স্থাপন করা হয়েছিল এবং ট্রান্সফেকশন কমপ্লেক্সের প্রস্তুতি শুরু হয়েছিল।

2. ট্রান্সফেকশনের আগে সাসপেনশন সেল প্রস্তুত করা হয়েছিল:

ক) স্থানান্তরের দিনে, মাধ্যমটি অপসারণের জন্য উপযুক্ত পরিমাণে কোষ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল

এবং সিরাম বা কম সিরাম ছাড়া বেসাল মিডিয়াম দিয়ে পুনরায় সাসপেন্ড করা হয়েছে (5% এর নিচে);

খ) প্রস্তুত সাসপেনশন কোষগুলি ইনকিউবেটরে স্থাপন করা হয় এবং এর প্রস্তুতি শুরু করে

ট্রান্সফেকশন কমপ্লেক্স, এবং ট্রান্সফেকশন কমপ্লেক্স এবং মিডিয়ামের মধ্যে আয়তনের অনুপাত হতে পারে

উপযুক্ত সমন্বয়ের জন্য অনুগত কোষের রেফারেন্স দিয়ে তৈরি করা হবে।

3. ট্রান্সফেকশন কমপ্লেক্স প্রস্তুত করা হয়েছিল:

ক) প্রস্তুতির তরল A: 100 μL সিরাম-মুক্ত বেস মিডিয়াম এবং 2 ug প্লাজমিড ডিএনএ, ফুঁ এবং

মিশ্রিত;

খ) তরল বি প্রস্তুত করা: সিরাম ছাড়া 100 লিটার বেস মিডিয়াম এবং 6-8 μL PEI 40 K ট্রান্সফেকশন

বিকারক, ফুঁ এবং মিশ্রণ;

গ) সলিউশন B তরল A-তে যোগ করা হয়েছিল, আলতো করে ফুঁকানো এবং মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং ঘরের তাপমাত্রায় সেদ্ধ করা হয়েছিল

একটি DNA-PEI ট্রান্সফেকশন কমপ্লেক্স গঠন করতে 15 মিনিট।

4. স্থানান্তরিত কোষ:

ক) পূর্ববর্তী ধাপে প্রাপ্ত ট্রান্সফেকশন কমপ্লেক্সটি পূর্বে পরিবর্তিত হোল প্লেটে যোগ করুন

দ্রবণ অতিক্রম করা বা পার্শ্ববর্তী;

খ) 37 ডিগ্রি, 5% CO2 ইনকিউবেটরে সম্পূর্ণরূপে মিশ্রিত এবং incubated করার জন্য প্লেট "8" বা অন্য উপায়ে ঝাঁকান;

গ) ডিএনএ-পিইআই ট্রান্সফেকশন কমপ্লেক্স 4 - 6 ঘন্টার জন্য কোষ সহ আরও ভাল ট্রান্সফেকশন দক্ষতা দেখিয়েছে,

উপযুক্ত এক্সটেনশন বা রাতারাতি ইনকিউবেশন এবং উত্তম স্থানান্তর দক্ষতা।

1. অনুগ্রহ করে সুস্থ কোষগুলিকে ভাল অবস্থায় ব্যবহার করুন এবং পুনরুদ্ধার করা কোষগুলি স্থানান্তরের আগে কমপক্ষে 2 বার পাস করার পরামর্শ দেওয়া হয়।

2. দয়া করে একটি উচ্চ-মানের, এন্ডোটক্সিন-মুক্ত, প্লাজমিড ডিএনএ ব্যবহার করুন।

3. প্রাথমিক ব্যবহারের জন্য, এটি সুপারিশ করা হয় যে পণ্যটি বারবার জমাট বাঁধা এবং গলানো এড়াতে বিতরণ করা হবে।

4. ট্রান্সফেকশনে সিরামের উচ্চ ঘনত্ব, সেইসাথে অ্যান্টিবায়োটিকের ব্যবহার, কোষের অবস্থার পাশাপাশি স্থানান্তর দক্ষতাকে প্রভাবিত করতে পারে।

5. বিভিন্ন কোষ সহনশীলতা, সংবেদনশীলতা, ট্রান্সফেকশন ইনকিউবেশন সময়ের দৈর্ঘ্য এবং PEI/DNA ব্যবহারের অনুপাত যথাযথভাবে সামঞ্জস্য করা হয়েছিল।

6. অপারেশনের সময় পরীক্ষামূলক স্যুট এবং ডিসপোজেবল গ্লাভস পরিধান করুন।

সময়সূচী: বিভিন্ন কোষ সংস্কৃতি পাত্রে স্থানান্তর ব্যবহার (শুধুমাত্র রেফারেন্সের জন্য)

শুধুমাত্র গবেষণা ব্যবহারের জন্য!

গরম ট্যাগ: pei 40k ট্রান্সফেকশন বিকারক, চায়না pei 40k ট্রান্সফেকশন রিএজেন্ট নির্মাতারা, সরবরাহকারী, কারখানা